| FNCA 2006 放射線育種ワークショップ |
添付資料3FNCA放射線育種バナナ耐病性専門家会合
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添付資料4FNCA放射線育種バナナ耐病性専門家会合
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| 1. 育種母材の選定 * 適切であったかどうか |
< フザリウム萎凋病抵抗性 > インドネシア : 品種名「 Berangan 」 ( ゲノム構成： AAA), ﾌｻﾞﾘｳﾑ菌レース 4 感受性 マレーシア : 品種名「 Berangan 」 ( 同上： AAA), ﾌｻﾞﾘｳﾑ菌レース 4 感受性 ベトナム : 品種名「 Tay 」 ( 同上： ABB), ﾌｻﾞﾘｳﾑ菌レース 1 感受性 < バナナバンチートップ病（BBTV） 抵抗性 ( 補足的に線虫抵抗性と Sigatoka 病抵抗性 ) > フィリピン : 品種名「 Lakatan 」 ( 同上： AA/AAA) BBTV 、ﾌｻﾞﾘｳﾑ菌、 Sigatoka 病感受性 |
| 2. 培養技術の決定 * クローンの組織培養、選抜された突然変異クローンの単離と増殖など |
- 外植片（培養に用いた器官）と培地 インドネシア : 雄花蕾 分裂組織に対して MS 基本培地 +3 mg/l ベンジルアミノプリン（BAP） +0.5 mg/l インドール酢酸（IAA） マレーシア : 茎頂 懸濁細胞（単細胞にして培地中に浮遊させたもの） MS 基本培地 + 5mg/l BAP ベトナム : 葉鞘片 / MS 基本培地 + 4mg/l BAP + 0.5 mg/l ナフタレン酢酸（NAA） フィリピン : 増殖中の培養シュート / MS 基本培地 + 5 mg/l BAP |
| 3. 放射線照射方法 * 適正線量、放射線感受性など |
a) 放射線感受性調査試験 / 植物数 / 照射線量 インドネシア : 0-80 Gy, 10 茎頂 /dose マレーシア : 0-100Gy, 100 分裂組織 , 5 反復 ベトナム : 0, 10, 20, 30, 40, 50Gy; 10 茎頂 /dose フィリピン : 0, 5, 10, 20, 25, 30, 40, 60, 80, 100Gy; 50 細胞塊（clumps） /dose b) 照射線量（Radiation dose） インドネシア : 50 ％致死（LD 50）： 40 Gy, 100 ％致死（LD 100）： 80 Gy 最適照射線量（Optimum dose）： 10-20Gy マレーシア : LD 50 ： 50 Gy, LD 100 ： 80 Gy 最適照射線量： 20, 30, 40 Gy ベトナム : LD 50 ： 30 Gy, LD 100 ： 60 Gy 最適照射線量： 20 Gy フィリピン : LD 50 ： 20-25 Gy, LD 100 ： 80 Gy 最適照射線量： 20 および 25 Gy 線量率（Dose rate）：今後の検討 |
| 4. 耐病性の突然変異クローンの選抜 * スクリーニング方法の構築 5. 選抜した突然変異体の圃場における試験と評価 * 圃場試験でのデータや突然変異体の能力 |
[ インドネシア ] 温室内スクリーニング : ‘hot spot' で採取した土壌をプラスチックのポットに入れ、１ポット１個体で培地から取り出して 10 日後の植物をポットに移植し、３ヶ月間育てる。 圃場スクリーニング : 温室内スクリーニングで生き残った植物を hot spot に移植；移植個体数： 489 [ マレーシア ] スクリーニング : 圃場スクリーニング : 上記のスクリーニング法で生存した植物を hot spot に移植する。ここで抵抗性の植物はさらに増殖し、 3 世代にわたって、 hot spot に移植して評価を行う。 [ ベトナム ] 温室内スクリーニング : a) 水耕栽培（胞子懸濁液） ; 1 週間処理 b) 浸漬法 : 胞子懸濁液 (10 5 胞子 /ml) 中で、 24 時間、根を浸漬する。 処理植物数：１回に 500 個体を容器中で同時に処理する。 hot spot での圃場スクリーニング : 必須項目 : BBTV 選択項目 : キュウリモザイクウイルス（CMV） および バナナブラクトモザイクウイルス（BBrMV） [ フィリピン ] 温室内スクリーニング : 培養植物をプラスチックポットに入れ、ウイルスを保毒したバナナアブラムシを 10 匹／ 1 植物に接種吸汁させる。接種後 1-9 ヶ月間にわたって、適宜、発病の有無を評価する。 BBTV の病徴のない植物については ELISA 検定を行う。 系統数 : 6,000 以上の植物体のスクリーニングを行い、 BBTV の病徴のない 114 個体を選抜した。 圃場スクリーニング : ELISA 検定で陰性と断定された抵抗性個体は組織培養によって増殖し、より高い強度で発病する圃場において、抵抗性を調査する。 この圃場による評価は、試験圃場あるいは農家の畑において 3 世代にわたって行う予定。 系統数 : 32 系統 (1 世代目 ) および 10 系統 (2 世代目 ). 1 系統あたりの供試植物数： 30 個体。すべての突然変異系統は組織培養によって維持されている。 |
| 6. 成果の報告（レポートなど） | Internal report, seminar and conferences, publication in journals, public patent Indonesia : 1. Ishak and Ita Dwimahyani (2005) Evaluation of banana mutant lines growth and tolerance to Fusarium f.sp cubense (FOC), Stigma Vol. XIII (1) pp:26-29 2. Ishak, Sasanti, W. and Yulidar (2004) Cloning and propagation of banana mutant line for selection purposes (Technical report 2004, CAIRT) 3. Ishak, Sasanti, W. Yulidar (2005) Cloning and propagation of banana mutant lines for selection purposes (Technical report 2005, CAIRT) |
| 7. プロジェクトのその他の成果や波及効果等 | 組織培養上の新しい知見の発見 培養から植物体作出までの期間の比較結果 分裂細胞 ( 茎頂 ) を用いた組織培養 : 6 ヶ月 細胞懸濁培養 : 12 ヶ月 注：細胞の懸濁培養の方がキメラの出現が少ないという利点はある反面、植物体を作出するまでに約 2 倍の時間がかかることを明らかにできた。 |
| 8. 本プロジェクトに関する意見（問題点、考え方、特記事項、要望等） | 効果的な hot spot を見つけることの難しさとそのための予算の捻出 注：真の「 hot spot 」は常に約 50 ％以上、目的とする病気が感受性品種に発病する試験圃場を意味する。この圃場を好ましい状態で維持するためには、常に、病原菌を圃場で増殖する措置が必要である。また、このような圃場は、必ず、他の圃場と隔離されていなければ、他の畑にまで病気が蔓延するという危険性をはらんでいる。そのためには、適切な措置と、圃場の隔離が必要不可欠であり、この管理のためには研究資金が必要である。 研究費の不足 ( インドネシア、マレーシア、フィリピン、ベトナム )I バナナ研究の国家プロジェクトの終了 ( マレーシア ) |
| 9. 他の研究機関との共同研究 | マレーシア : マレーシア大学（University of Malaya）、バナナ会社 インドネシア : アンダラス大学（Andalas University）、バナナ会社 ベトナム : 野菜果樹研究所（Vegetable and Fruit Research Institute）、バナナ会社 フィリピン : PNRI, IAEA, PCARRD, バナナ農家 |
| 10. エンドユーザー（育成品種が利用される対象農家あるいは企業） | マレーシア : 一般農家 ( 圃場面積 1 ha 前後 ) および共同プランテーションやバナナ会社（圃場面積 40 ha 以上 ) インドネシア : 伝統的農業を営む農家 ( 栽培面積 0.5 - 2 ha) ベトナム : 小規模農家 ( 栽培面積 1 ha 未満 ) フィリピン : 小規模農家 ( 栽培面積 5 ha 未満 ) |
添付資料5
FNCA放射線育種バナナ耐病性専門家会合
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| 2005 年度 | 2006 年度 | 2007 年度 | 2008 年度 | |
| サブプロジェクト 3 “ バナナの耐病性 ” (2004 年〜 ) |
<BBTV>
<フザリウム> ＊中間報告
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<BBTV （その他） >
＜フザリウム＞ |
<BBTV （その他） >
<フザリウム > ＊最終報告
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